TEST de FRAGILIDAD OSMOTICA

ALUMNA de TECNOLOGIA MEDICA (UNMSM): Ruth Ines Mirano Villafuerte.

e-mail: le_croixe@hotmail.com

En ciertos estados patológicos los eritrocitos se destruyen continua y aceleradamente ocasionando anemia. En estos casos interesa averiguar si la hemólisis excesiva depende de una mayor fragilidad de los eritrocitos (esferocitosis hereditaria). Se comprueba la resistencia de los eritrocitos sometiéndolos a la acción de varios agentes nocivos. En las técnicas clínicas se emplean casi siempre soluciones hipotónicas. Los hematíes suspendidos en solución hipotónica de cloruro de sodio absorben agua, se hinchan, adquieren forma esférica, se hacen más frágiles, reventando. El incremento de la fragilidad conduce a lisis del hematíe, estado determinado por 2 factores :a) es inversamente proporcional a la concentración de cloruro de sodio y b) es directamente proporcional al grosor de la membrana de los hematíes.

Foto:Tomado de Farreras /2005.

La célula que más se aproxima a la forma esférica (esferocito), tiene un volumen muy pequeño para su contenido estando su capacidad de expansión, limitada. Por lo tanto a concentraciones relativamente bajas de sa (hipotónicas), estalla al absorber pequeñas cantidades de agua (fragilidad osmótica aumentada).

MATERIALES:

-28 tubos de ensayo
-Soluciones hipotónicas con las siguientes concentraciones: 0.10 %, 0.20 %, 0.30%, 0.35%, 0.40%, 0.45%, 0.50 %, 0.55%, 0.60 %, 0.65%, 0.70%, 0.75%, 0.80%, 0.85%.
-Muestra problema
-Muestra control

PROCEDIMIENTO:

-Extraer sangre del paciente y de un control normal en tubos con anticoagulante EDTA
-Colocar soluciones de cloruro de sodio (5 ml), en los siguientes tubos: 0.10 %, 0.20 %, 0.30%, 0.35%, 0.40%, 0.45%, 0.50 %, 0.55%, 0.60 %, 0.65%, 0.70%, 0.75%, 0.80%, 0.85%.

-Colocar 0.05 ml de sangre a cada tubo, mezclar y dejar reposar a temperatura ambiente por 30 minutos.

-Centrifugar a 2500 rpm por 5 minutos.

VALORES NORMALES

-Hemólisis inicial: se observa en el tubo con NaCL al 0.45%.
-Hemólisis total: se observa en el tubo con NaCl al 0.35%.

-Hemólisis inicial
(NaCl %)
-Hemólisis completa (NaCl %)

-Normal
0.45
0.35
-Esferocitosis hereditaria
0.65
0.45
-Anemia hemolítica adquirida
0.50
0.40
-EHRN
0.55
0.40
-Talasemia
0.35
0.20
-Anemia falciforme
0.35
0.20

Bibliografía

1-Harmening,M. Denise, PhD, MT (ASCP),CLS(NCA).2002. Clinical Hematology and Fundamentals of Hemostasis. 3 th Ed. F:A: Davis Company, Philadelphia, p. 616.
2-Ballcells, Alfonso , 2002. La Clinica y el Laboratorio. 19th Edición, Masson, S.A.